经由肠胃道和呼吸道感染人类的肠病毒（enterovirus，简称EV）有很多种，虽然大部分引发的都是轻症，但仍有少数会造成脑膜炎、脑炎、急性无力脊髓炎（acute flaccid myelitis）、急性松弛性瘫痪（acute flaccid paralysis）等严重的神经系统症状，甚或导致死亡。

像是肠病毒A71型（EV-A71，即过去所说的肠病毒71型）和D68型（EV-D68）就是造成重症的两大病毒型别，也是科学家在研发肠病毒疫苗时主要的防范对象。

2020年，台湾大学医学院免疫学研究所江伯伦教授、台大医院医学研究部林郁里副研究员等已经证明灵芝多糖PS-G可大幅提高鼻滴式肠病毒A71型单价疫苗的免疫保护力。

2023年底，该团队发表在《Journal of Biomedical Science》（生医科学杂志）的论文则进一步证明，灵芝多糖PS-G亦能增强鼻滴式肠病毒A71型和D68型二价疫苗诱发的免疫力，大幅降低这两种肠病毒对幼鼠的死亡威胁。

本研究的二价疫苗是以灭活（死掉）的肠病毒A71型和D68型作为诱发免疫系统产生抗体的抗原；添加在疫苗中用来刺激免疫反应、提高疫苗效果的佐剂，则是以特定流程提取自灵芝子实体热水提取物的灵芝多糖PS-G（polysaccharide purified from Ganoderma lucidum）。

PS-G是含有5%蛋白质的β-D-glucan（β葡聚醣），分子量近15万，具有β（1→3）键结主链与β（1→6）键结分支的基本结构，先前已被证实可以加速树突细胞活化（正确辨识和处理病原体）和成熟（正确激发后续的免疫反应），进而通过T细胞提升免疫系统抗感染和抗肿瘤的能力。

接种方式是从鼻孔慢慢滴入12 μL的疫苗滴剂（每个鼻孔各6 μL），内含灭活的肠病毒A71型和D68型各2.5 μg（肠病毒二价疫苗组），添加灵芝多糖为佐剂者另外加入10 μg的PS-G（灵芝多糖PS-G＋肠病毒二价疫苗组），每三周接种一剂，总共接种三剂，接种完最后一剂之后的2周检测疫苗诱发的免疫力。

实验同时以20 μg的人用佐剂CpG取代PS-G的位置（对照佐剂CpG＋肠病毒二价疫苗组）用来比较PS-G的效果，并设有空疫苗组（有接种动作，但滴入小鼠鼻腔的是生理盐水）模拟没有疫苗保护的情况。

结果发现，在同样实验条件下，比起未添加佐剂，或添加CpG佐剂的肠病毒二价疫苗，接种“灵芝多糖PS-G＋肠病毒二价疫苗”的小鼠：

为了确认疫苗诱发的免疫力真能对抗病毒，研究者还做了另一个动物实验，也就是把接种过“肠病毒二价疫苗”或“灵芝多糖PS-G＋肠病毒二价疫苗”的小鼠血清，从腹腔注射到2天大的幼鼠体内，6小时后再从脑内注入致死剂量的肠病毒D68型或A71型，持续观察14天。

结果发现，这两种血清都能帮助幼鼠对抗肠病毒D68型和A71型，但接受“接种过灵芝多糖PS-G＋肠病毒二价疫苗的小鼠血清”的幼鼠受到的保护程度更高：不只健康状况媲美未感染的幼鼠或是能从消瘦的病态中快速康复（而不是恶化成肢体无力或麻痹），存活率更达到百分之百（图4）；进一步分析其大脑、脊髓和肌肉组织的病毒量也确实明显较少（图5）。

图4 “接种肠病毒二价疫苗的小鼠血清”对初生幼鼠抗感染的保护力之一：减少重症率＆增加存活率

图5 “接种肠病毒二价疫苗的小鼠血清”对初生幼鼠抗感染的保护力之二：减少病毒量

理想上疫苗最好可以同步启动黏膜免疫反应和全身性免疫反应，因为前者可以强化呼吸道、口腔和肠道的黏膜屏障，抵挡病毒入侵；后者可以提高血液循环中的抗体和白血球数量，中和入侵体内的病毒。

然而目前绝大多数的疫苗都是肌肉或皮下注射剂型，只能诱发全身性免疫反应；至于透过刺激黏膜（如鼻黏膜）诱发的免疫反应则有不够强大的问题，使得佐剂的选择被视为是突破困境的契机。

现有的肠病毒疫苗就都是肌肉注射型，而且只有肠病毒A71型的疫苗，尚无可能在未来变成主流的肠病毒D68型的疫苗。因此，在本研究胜出的“以灵芝多糖PS-G为佐剂的鼻滴式肠病毒二价疫苗”，可以“一箭双雕”地大幅提升黏膜免疫和全身性免疫，防止肠病毒的致命攻击，无痛的接种过程也更为方便友善，显然已经为新一代肠病毒疫苗刻画出理想的蓝图，也为灵芝多糖作为肠病毒疫苗佐剂的安全性与有效性再添一枚徽章。

〔资料来源〕Yu-Li Lin, et al. A novel mucosal bivalent vaccine of EV-A71/EV-D68 adjuvanted with polysaccharides from Ganoderma lucidum protects mice against EV-A71 and EV-D68 lethal challenge. J Biomed Sci. 2023;30(1):96.